Evaluación de un método de extracción de glicoproteína de glándulas submaxilares de bovino / Evaluation of an extraction method glycoprotein bovine submaxillary glands

Los métodos utilizados para la obtención de glicoproteínas de glándulas submaxilares de bovino consisten en esquemas que implican la eliminación de compuestos acuoinsolubles, aislamiento y purificación de las glicoproteínas. El propósito de este estudio fue evaluar un método de obtención de glicoproteínas (Escalona y col. 1989) a partir de glándulas de bovino para obtener un extracto mucínico destinado a la elaboración de un sustituto salival, con el fin de conocer el tipo y cantidad de proteínas presentes y su asociación con la viscosidad. Se analizaron 6 fases acuosas posteriores a la primera centrifugación. De cada una de las fases acuosas se tomó una alícuota y se determinó la cantidad de proteínas totales, y la viscosidad. La viscosidad aparente se midió con un viscosímetro Marca Brokfield modelo LVT con un eje Nº4 a una velocidad de desplazamiento a 73.42seg-1, y las proteínas se caracterizaron por electroforesis en geles de SDS-PAGE al 8 por ciento. Cada uno de los geles se escaneo y la densitometría se realizó en forma computarizada (un programa MultiAnalystTM /PC -Bio Rad- Versión 1.1). Se observó que a medida que se avanzaba en el esquema de extracción de glicoproteínas disminuía la cantidad de proteínas totales, el patrón electroforético mostró diferencias cualitativas entre las muestras evaluadas lo cual se reflejó en una disminución estadísticamente significativa (p<0,05) de la viscosidad aparente. Al expresar la viscosidad con relación al contenido proteico ésta aumentaba, lo que nos permitió inferir que a pesar que hubo una perdida de proteínas se preservaron las glicoproteínas viscosas a expensa del rendimiento proteico

For the obtainment of glycoproteins from bovine submaxillary glands methods are used that encompass the elimination of insoluble compounds, and fractionation and purification procedures. This study was designed to evaluate a particular method (Escalona et al. 1989) for the obtainment of glycoprotein to be used in the preparation of a salivary substitute, and aimed to gathering information on the type and amount of present proteins and their association with viscosity. For this purpose, the six aqueous phases following a centrifugation step in the fractionation scheme were analyzed for protein content (Lowry et al 1951), aparent viscosity (Brookfield viscometer, model LVT), and 8 percent SDS-PAGE electrophoresis with electronic processing of the densitograms (Bio-Rad/multi Analyst). The protein content, aparent viscosity (statistically significant P<0.05), and number of electrophoretic bands showed a decrease with the progress of the fractionation procedure. However, when aparent visxosity was ex pressed in terms of protein content it showed an increase, which is consonous with the relative enrichmentain of the fractions glycoprotein along the purification procedure

Efecto inhibitorio del nonanoato de potasio y el fluoruro de sodio en la acidogenicidad de la placa dental humana in vitro / In vitro inhibitory effect of potassium nonanoate and sodium fluoride on acidogenity of human dental plaque

El ácido nonanoico es un ácido graso saturado de 9 carbonos el cual se ha demostrado reduce la aparición de caries de fisura en ratas cuando es incluido en la dieta (Hayes y Berkovitz, 1979). En 1979 Griffiths demostró que el nonanoato de potasio agregado en enjuagues con sacarosa inhibe la producción de ácidos por parte de la bacaterias de la placa dental en humanos. El objetivo de esta invesstigación fue estudiar el efecto de ácidos grasos y fluoruros en la producción de ácidos en placa dental de humanos in vitro. Para ello se recolectó placa dental en ayunas de 3 horas, en niños con caries activa y con edades comprendidas entre los 5 y 12 años. La producción de ácidos fue determinada por el método de titulación reportado por Hayes y Roberts (1980), luego de la adición de la glucosa exógena. Los resultados demostraron que a pH 7,4 el NK (3mM) y el NaF (13mM) produjeron una inhibición en la producción de ácidos en un 45 por ciento y 54,5 por ciento respectivamente, mientras que con la mezcla se observó un reducción de un 39 por ciento. A pH 5,5 el NK y el NaF a una concentración de 0,26mM produjeron una inhibición de 21,2 por ciento y 29,3 por ciento respectivamente y cuando se mezclaron esta inhibición se incrementó a 49,3 por ciento. Estos resultados sugieren que a pHs cercanos a la neutralidad (7,4) no hay efecto adhitivo del NK y el NaF, mientras que a pH ácido (5,5) la combinación de estos compuestos incrementó significativamente (p<0,01) su efectividad

Variación de la viscosidad en un sustituto salival en base a mucina por cambios en el pH y la concentración de proteinas / Variation of the viscosity in mucin saliva substitute by changes in the pH and proteins concentrations

Una de las funciones de la saliva es proteger las superficies bucales y faríngeas para así mantener la integridad de estos tejidos. La saliva debe la función protectora a su capacidad humectante, lubricante etc. Las cuales a su vez se deben a los elementos que la componen, principalmente a las proteínas y a las glicoproteínas (mucinas) de alto peso molecular. Estos compuestos son políones enfotéricos que tienen carga neta positiva o negativa determinada por la ionización de los grupos polares en sus cadenas laterales, que es dependiente del pH del medio. Por lo tanto un cambio en el pH del medio puede causar variaciones en: la carga neta de la proteína, enlace de hidrógeno, las interaciones hidrofólicas etc., lo que afecta su conformación y puede ocacionar la formación de agregados moleculares. La conformación y la interacción entrw macromoléculas salivales afectan la viscosidad de la solución en la cual se encuentran disueltas. La viscosidad es el principal factor determinante de la capacidad lubricante del fluido salival. Por esta razón, la viscosidad es un parámetro de medida de los factores que modifican la capacidad lubricante de la saliva. Estudios realizados por Veerman et al, y Nordbo et al, indican que los cambios en el pH del medio influencian significativamente la viscosidad de la saliva total humana y de sustitutos salivales a base de mucina. Sin embargo, hay una gran discrepancia entre los valores de pH a los cuales se reporta un cambio de la viscosidad